Gids chromatografie: HPLC- en GC-kolommen, vials en staalvoorbereiding
Begin de kolomkeuze bij de analyt: polariteit, grootte en lading bepalen de stationaire fase; de drukgrens van uw toestel en de detector bepalen deeltjesgrootte en kolomdiameter. Zuivere stalen, de juiste vial en gefilterde solventen beschermen beide.
Luminix Health is een Europese leverancier en distributeur van laboratorium- en ziekenhuisbenodigdheden, met 150.000+ producten van gevestigde fabrikanten en levering in de hele EU in twee tot vijf dagen indien op voorraad.
Onderdeel van de Luminix Health Laboratoriumgids. Gratis download, geen formulier: Laboratoriumgids (pdf).
Laatst bijgewerkt: 24 oktober 2026
HPLC- en UHPLC-kolommen
| Fase | Ideaal voor | Opmerking |
|---|---|---|
| C18 (octadecyl) | De meeste kleine moleculen, het standaard vertrekpunt | Kies een end-capped of polar-embedded C18 voor basen |
| C8 | Minder retentie, snellere elutie van hydrofobe stoffen | Nuttig voor peptiden en steroïden |
| Fenylhexyl | Aromatische verbindingen, alternatieve selectiviteit | Goede tweede kolom bij methodeontwikkeling |
| HILIC | Zeer polaire stoffen die op C18 te vroeg elueren | Mobiele fase met veel organisch solvent, MS-vriendelijk |
| Ionenwisseling / size exclusion | Eiwitten, oligonucleotiden, geladen deeltjes | Controleer pH- en zoutgrenzen |
Typische waarden ter oriëntatie; controleer altijd het datablad van de fabrikant. Bronnen: zie Officiële bronnen hieronder.
Volledig poreuze deeltjes van 5 µm passen bij klassieke HPLC; 3 µm en core-shell 2,7 µm geven meer efficiëntie bij matige druk; onder 2 µm is UHPLC nodig. Een kolom van 4,6 × 150 mm is een gangbare standaard; 2,1 mm binnendiameter bespaart solvent en past bij LC-MS. Plaats een voorkolom om de levensduur te verlengen.
GC-kolommen
Kies voor capillaire GC de fase op polariteit: 100 % dimethylpolysiloxaan voor apolaire analyten, 5 % fenyl als algemene keuze, middelpolaire cyanopropylfasen voor pesticiden en solventen, en polyethyleenglycol (WAX) voor alcoholen, zuren en aroma's. Een kolom van 30 m × 0,25 mm × 0,25 µm is het gebruikelijke vertrekpunt; een dikkere film houdt vluchtige stoffen beter vast.
Vials, filters en solventen
- Autosamplervials van 2 ml bestaan met schroefdop (9 mm of 8-425), krimpdop of snapdop; controleer wat uw autosampler aanvaardt.
- Gebruik amberkleurige vials voor lichtgevoelige stalen en inserts of laagvolumevials voor kleine stalen.
- PTFE/siliconen septa passen bij de meeste methoden; zuiver PTFE weerstaat agressieve solventen maar sluit na meerdere injecties niet opnieuw af.
- Filter stalen door 0,45 µm voor HPLC en 0,2 µm voor UHPLC of kolommen onder 2 µm.
- Gebruik solventen van HPLC- of LC-MS-kwaliteit en water van graad 1 volgens ISO 3696.
Zie onze Laboratoriumgids voor de keuze van spuitfilters in detail.
Veelgestelde vragen
Met welke HPLC-kolom begin ik?
Voor de meeste kleine moleculen: een C18-kolom van 4,6 × 150 mm met deeltjes van 3 of 5 µm. Stap over naar fenylhexyl of HILIC als selectiviteit of retentie onvoldoende is.
Waarom stijgt de tegendruk van mijn kolom?
Meestal omdat deeltjes of neergeslagen buffer de inlaatfrit blokkeren. Filter stalen en mobiele fasen, gebruik een voorkolom en spoel buffers uit met water voor u naar veel organisch solvent overschakelt.
Schroef-, krimp- of snapvials?
Schroefdoppen zijn eenvoudig en betrouwbaar, krimpdoppen sluiten het best af voor vluchtige stalen en lange reeksen, en snapdoppen zijn snel maar sluiten minder strak. De autosampler beslist eerst.
C18, C8 of fenyl: welke fase?
C18 geeft de meeste retentie en is de standaard. C8 houdt minder vast, wat de analysetijd voor hydrofobe analyten verkort. Fenylfasen voegen π–π-selectiviteit toe voor aromatische verbindingen.
Welke GC-kolomafmetingen zijn standaard?
30 m × 0,25 mm inwendige diameter × 0,25 µm film past voor de meeste methoden. Gebruik een dikkere film voor zeer vluchtige analyten en een nauwere of kortere kolom voor snellere analyses.
Welke spuitfilter gebruik ik voor HPLC?
0,45 µm voor kolommen met deeltjes van 3 µm of groter, 0,2 µm voor UHPLC en deeltjes onder 2 µm. PTFE past bij organische solventen, PES en nylon bij waterige stalen, en geregenereerde cellulose dekt beide met lage binding.
Bestellen uit de Luminix Health-catalogus
- HPLC-kolommen & toebehoren
- GC-kolommen & toebehoren
- Vials, doppen & septa
- SPE & staalvoorbereiding
- Filtratie en spuitfilters
- DLC
Offerte nodig voor meerdere artikelen of een raamcontract? Stuur uw lijst naar sales@luminixhealth.com.
